双缩脲试剂检测蛋白质的实验(双缩脲试剂鉴定蛋白质原理步骤)
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1、當(dāng)脲被小心地加熱至?150~160℃時(shí),可由兩個(gè)分子間脫去一個(gè)氨分子而生成二縮脲(也叫雙縮脲)。
2、?雙縮脲與堿及少量硫酸銅溶液作用生成紫紅色的配合物,此反應(yīng)稱(chēng)為雙縮脲反應(yīng):?由于蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵(CONH),與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似,故也能呈現(xiàn)此反應(yīng)而生成紫紅色配合物,在一定條件下其顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比,據(jù)此可用吸收光度法來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)含量,該配合物的最大吸收波長(zhǎng)為560nm。
3、本法靈敏度較低,但操作簡(jiǎn)單快速,故在生物化學(xué)領(lǐng)域中測(cè)定蛋白質(zhì)含量時(shí)常用此法。
4、本法亦適用于豆類(lèi)、油料、米谷等作物種子及肉類(lèi)等樣品測(cè)定。
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總結(jié)
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