在基于高通量測(cè)序的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷中，科學(xué)家為了提高檢測(cè)準(zhǔn)確性、并節(jié)省測(cè)序成本，想了許多辦法。檢測(cè)囊泡DNA是一種新的大幅提高檢測(cè)準(zhǔn)確性的手段。這種方法的原理是：在懷孕2~3月齡時(shí)，母親血液中約50%的囊泡是來(lái)自胎兒的。來(lái)自胎兒的囊泡中幾乎是純的胎兒DNA相比于血漿游離DNA中胎兒DNA占5~10%的比例，所有囊泡DNA中胎兒DNA的占比要高得多針對(duì)胎兒染色體異常，對(duì)囊泡DNA進(jìn)行測(cè)序，相對(duì)于測(cè)血漿游離DNA，檢出靈敏度會(huì)高許多

檢測(cè)囊泡DNA確實(shí)能夠大幅提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。其方法大概可以概括為，取得血清后，用DNase酶進(jìn)行處理，DNase無(wú)法進(jìn)入囊泡，只能消化掉囊泡外的游離DNA。囊泡內(nèi)的DNA得以保存。再用Proteinase K蛋白消化酶處理，蛋白酶把DNase消化掉用苯酚/氯仿處理，把所有的蛋白（包括Proteinase K)變性破壞掉，同時(shí)也把囊泡的膜破掉，囊泡中的DNA釋放出來(lái)。水相用乙醇/異丙醇沉淀回收DNA，對(duì)回收的DNA進(jìn)行高通量測(cè)序（也可以考慮用DD-PCR或其它方法進(jìn)行定量檢測(cè)）。檢測(cè)片段大小在200bp左右的血漿游離DNA，因?yàn)橹挥行∑蔚腄NA才更易透過(guò)母親與胎兒之間的胎盤(pán)屏障，進(jìn)入母親的血液中，所以母血中小片段（200bp)中，胎兒的DNA的占比會(huì)高，通過(guò)電泳/柱回收等手段，提取小片段DNA進(jìn)行高通量測(cè)序。這一方法已被多家實(shí)驗(yàn)室采用。相關(guān)文獻(xiàn): http://www.clinchem.org/content/50/6/1002.short。

總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的测囊泡DNA是更灵敏的无创产前诊断方法吗？的全部?jī)?nèi)容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問(wèn)題。

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