基因治疗中基因的转移途径,有谁知道?
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                                基因治疗中基因的转移途径,有谁知道?
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                            基因轉移途徑有兩類:一類是活體直接轉移,即將帶有目的基因的病毒、脂質體或裸露DNA直接注射到體內;另一類是離體轉移,即將試驗對象的細胞取出,經體外培養后導入基因,然后將這些細胞重新移回試驗體內。目前,臨床常采用瘤體內直接注射與肝動脈注射相結合的方法。
基因轉移治療疾病的途徑有兩大類:一類為體內治療(in vivo),即將帶有遺傳物質的基因的病毒、脂質體或裸露DNA直接注射到組織器官或血管內,或通過口服、噴霧等方式將遺傳物質導人到試驗個體內。另一類是經體外至體內的治療(ex-vivo),是將試驗對象的細胞取出,體外培養導人基因,而后將這些經過遺傳修飾的細胞重新輸回試驗個體內。ex vivo的方法安全,而且效果較易控制,但步驟多,技術復雜。in vivo方法操作簡便,容易推廣,但存在轉導效率低、療效短及安全性等問題。in vivo是基因治療(gene therapy)研究的發展方向,只有in vivo基因轉移方法成熟了,基因治療(gene therapy)才能真正走向臨床應用。
1、經活體。即將靶細胞經體外導入外源基因及體外增殖、篩選、藥物或其他處理操作后,再輸回試驗個體體內。2、活體內。即將含外源基因的重組病毒在確保不存在復制型病毒的前提下直接應用于試驗個體,此外還包括脂質體包埋或裸露DNA直接注射到試驗個體體內等方法。經活體基因轉移途徑比較經典,安全,同時治療效果比較容易控制,但操作步驟多,技術較復雜,不容易推廣,活體內基因轉移途徑操作簡便,容易推廣。雖然活體內基因轉移途徑目前尚不成熟,未能徹底解決療效短,免疫排斥以及安全性等問題,但仍是基因轉移途徑研究的重點方向,只有這種方法完善成熟以后,人類基因治療才能真正應用于臨床。用于基因治療的基因轉移方法主要包括生物學方法(①至④)和生物學方法(⑤至③):①逆轉錄病毒載體介導法(隨機整和,具有破壞細胞生長的必需基因,破壞抑癌基因,激活原癌基因等潛在危險。)②腺病毒載體介導法(不整和,安全性較高;不能穩定表達。);③腺相關病毒(AAV)載體介導法(可靶向整和,不能獨立復制,對人類無致病性,不激活原癌基因。);④單純皰疹病毒(HSV)載體介導法(可感染非分裂細胞,對感染細胞產生毒性,HSV的感染往往會導致非神經性宿主細胞蛋白質翻譯的關閉和mRNA的降解。);⑤脂質體介導法(利用陽離子脂質體單體包埋外源DNA,通過細胞內吞作用將外源DNA轉移至細胞內。);⑥直接注射法(將裸露基因DNA直接注入或將DNA團塊植入肌肉或某些器官組織。);⑦受體介導基因轉移法(受體介導的細胞內吞作用,具有細胞、組織或器官專一性。);⑧其它方法(磷酸鈣共沉淀法、電穿孔法、細胞核顯微注射法、基因槍顆粒轟擊法等。)
                        
                        
                        基因轉移治療疾病的途徑有兩大類:一類為體內治療(in vivo),即將帶有遺傳物質的基因的病毒、脂質體或裸露DNA直接注射到組織器官或血管內,或通過口服、噴霧等方式將遺傳物質導人到試驗個體內。另一類是經體外至體內的治療(ex-vivo),是將試驗對象的細胞取出,體外培養導人基因,而后將這些經過遺傳修飾的細胞重新輸回試驗個體內。ex vivo的方法安全,而且效果較易控制,但步驟多,技術復雜。in vivo方法操作簡便,容易推廣,但存在轉導效率低、療效短及安全性等問題。in vivo是基因治療(gene therapy)研究的發展方向,只有in vivo基因轉移方法成熟了,基因治療(gene therapy)才能真正走向臨床應用。
1、經活體。即將靶細胞經體外導入外源基因及體外增殖、篩選、藥物或其他處理操作后,再輸回試驗個體體內。2、活體內。即將含外源基因的重組病毒在確保不存在復制型病毒的前提下直接應用于試驗個體,此外還包括脂質體包埋或裸露DNA直接注射到試驗個體體內等方法。經活體基因轉移途徑比較經典,安全,同時治療效果比較容易控制,但操作步驟多,技術較復雜,不容易推廣,活體內基因轉移途徑操作簡便,容易推廣。雖然活體內基因轉移途徑目前尚不成熟,未能徹底解決療效短,免疫排斥以及安全性等問題,但仍是基因轉移途徑研究的重點方向,只有這種方法完善成熟以后,人類基因治療才能真正應用于臨床。用于基因治療的基因轉移方法主要包括生物學方法(①至④)和生物學方法(⑤至③):①逆轉錄病毒載體介導法(隨機整和,具有破壞細胞生長的必需基因,破壞抑癌基因,激活原癌基因等潛在危險。)②腺病毒載體介導法(不整和,安全性較高;不能穩定表達。);③腺相關病毒(AAV)載體介導法(可靶向整和,不能獨立復制,對人類無致病性,不激活原癌基因。);④單純皰疹病毒(HSV)載體介導法(可感染非分裂細胞,對感染細胞產生毒性,HSV的感染往往會導致非神經性宿主細胞蛋白質翻譯的關閉和mRNA的降解。);⑤脂質體介導法(利用陽離子脂質體單體包埋外源DNA,通過細胞內吞作用將外源DNA轉移至細胞內。);⑥直接注射法(將裸露基因DNA直接注入或將DNA團塊植入肌肉或某些器官組織。);⑦受體介導基因轉移法(受體介導的細胞內吞作用,具有細胞、組織或器官專一性。);⑧其它方法(磷酸鈣共沉淀法、電穿孔法、細胞核顯微注射法、基因槍顆粒轟擊法等。)
總結
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