基因工程酵母的创建过程是怎样的?用途有哪些方面?
生活随笔
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基因工程酵母的创建过程是怎样的?用途有哪些方面?
小編覺得挺不錯的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個參考.
有一項最近的研究報道,可用一種基因工程酵母生產(chǎn)阿片類止痛藥:美國斯坦福大學(xué)的生物工程學(xué)家使用來自罌粟和一種細(xì)菌的5個基因(3個基因來自罌粟,另外2個基因來自生存于罌粟莖干的該細(xì)菌)創(chuàng)建了一種基因工程酵母,該酵母可從其前體細(xì)胞中生物合成出鴉片。這種工程化酵母生產(chǎn)的鴉片分子等同于從罌粟中生產(chǎn)的天然和半合成鴉片藥物。這或可成為這些必要藥物的一種替代來源。研究人員表示:“我們現(xiàn)在非常接近以一種排除罌粟種植需要的方式來復(fù)制整個鴉片生產(chǎn)過程,這將允許我們確實地產(chǎn)生必要的藥物(如嗎啡、氧可酮),同時也可降低這類藥物被轉(zhuǎn)移至非法用途的可能性。”
酵母基因工程菌的構(gòu)建過程:1.目的基因的獲取: 獲取目的基因是實施基因工程的第一步,有三種方法提取目的基因。(1)鳥槍法(2)化學(xué)合成法(3)用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)提取。2.選擇合適的載體并插入目的基因: 基因表達(dá)載體的構(gòu)建,即目的基因與運載體結(jié)合。是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。 3.將目的基因?qū)虢湍妇词荏w細(xì)胞內(nèi):目的基因的片段與運載體在生物體外連接形成重組 DNA 分子后。用人工方法使體外重組的 DNA 分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞,主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。4.將重組 DNA 分子引入受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增:重組的 DNA 分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)就會 大量擴(kuò)增。5.目的基因的監(jiān)測與鑒定:運用 DNA 分子雜交技術(shù)來檢測目的基因, 分子雜交技術(shù)檢測 mRNA, 抗原抗體雜交技術(shù)檢測蛋白質(zhì)。酵母基因工程菌在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用1.面包酵母的應(yīng)用2. 葡萄酒酵母的應(yīng)用3. 釀酒酵母的應(yīng)用等
構(gòu)建來說的話,其實最主要的方式還是誘變和質(zhì)粒導(dǎo)入整合基因組。應(yīng)用的話最實在的還是產(chǎn)品擴(kuò)大~
在基因工程中,酵母菌常作為受體細(xì)胞。感受態(tài)畢氏酵母的制備如下:1、接種Pachia pastoris到50ml YPD培養(yǎng)基中,30℃搖菌過夜(約24~28h)培養(yǎng)到OD值為0.8~1.0(約108 Cells/ml);2、收獲細(xì)胞,用25ml無菌水洗滌 一次,室溫下1500g離心10min;3、重懸細(xì)胞 于1ml 100mM LiCl溶液中,將懸液轉(zhuǎn)入1.5ml離心管 ;4、離心機(jī)最大速度離心15秒沉淀菌體,重懸菌體于400ul 100mM LiCl溶液中;5、按50ul/管分裝,立即進(jìn)行轉(zhuǎn)化;注:不要將感受態(tài)酵母菌冰?。唤湍妇鸀檎婧思?xì)胞,具有多種細(xì)胞器,所以在用于生產(chǎn)需加工分泌的蛋白質(zhì)時有很大優(yōu)勢。比如疫苗,藥物等。酵母感受態(tài)細(xì)胞制備可以:(1)用于建立酵母轉(zhuǎn)化體系;(2)用于酵母表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建;(3)用于酵母其他分子生物學(xué)研究。
酵母基因工程菌的構(gòu)建過程:1.目的基因的獲取: 獲取目的基因是實施基因工程的第一步,有三種方法提取目的基因。(1)鳥槍法(2)化學(xué)合成法(3)用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)提取。2.選擇合適的載體并插入目的基因: 基因表達(dá)載體的構(gòu)建,即目的基因與運載體結(jié)合。是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。 3.將目的基因?qū)虢湍妇词荏w細(xì)胞內(nèi):目的基因的片段與運載體在生物體外連接形成重組 DNA 分子后。用人工方法使體外重組的 DNA 分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞,主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。4.將重組 DNA 分子引入受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增:重組的 DNA 分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)就會 大量擴(kuò)增。5.目的基因的監(jiān)測與鑒定:運用 DNA 分子雜交技術(shù)來檢測目的基因, 分子雜交技術(shù)檢測 mRNA, 抗原抗體雜交技術(shù)檢測蛋白質(zhì)。酵母基因工程菌在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用1.面包酵母的應(yīng)用2. 葡萄酒酵母的應(yīng)用3. 釀酒酵母的應(yīng)用等
構(gòu)建來說的話,其實最主要的方式還是誘變和質(zhì)粒導(dǎo)入整合基因組。應(yīng)用的話最實在的還是產(chǎn)品擴(kuò)大~
在基因工程中,酵母菌常作為受體細(xì)胞。感受態(tài)畢氏酵母的制備如下:1、接種Pachia pastoris到50ml YPD培養(yǎng)基中,30℃搖菌過夜(約24~28h)培養(yǎng)到OD值為0.8~1.0(約108 Cells/ml);2、收獲細(xì)胞,用25ml無菌水洗滌 一次,室溫下1500g離心10min;3、重懸細(xì)胞 于1ml 100mM LiCl溶液中,將懸液轉(zhuǎn)入1.5ml離心管 ;4、離心機(jī)最大速度離心15秒沉淀菌體,重懸菌體于400ul 100mM LiCl溶液中;5、按50ul/管分裝,立即進(jìn)行轉(zhuǎn)化;注:不要將感受態(tài)酵母菌冰?。唤湍妇鸀檎婧思?xì)胞,具有多種細(xì)胞器,所以在用于生產(chǎn)需加工分泌的蛋白質(zhì)時有很大優(yōu)勢。比如疫苗,藥物等。酵母感受態(tài)細(xì)胞制備可以:(1)用于建立酵母轉(zhuǎn)化體系;(2)用于酵母表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建;(3)用于酵母其他分子生物學(xué)研究。
總結(jié)
以上是生活随笔為你收集整理的基因工程酵母的创建过程是怎样的?用途有哪些方面?的全部內(nèi)容,希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。
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