PCR引物的OD是什么?引物的OD数如何定量?
生活随笔
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PCR引物的OD是什么?引物的OD数如何定量?
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為了確定引物濃度,可以在260nm(OD260)測量光密度值。然后使用光吸收值和微摩消光系數(shù)的倒數(shù)(nmol/OD),通過Beers法則計(jì)算引物濃度。1個OD值的合成DNA的重量約為33ug。引物合成引物OD數(shù)是這樣測定的:用紫外分光光度計(jì),波長260nm,石英比色杯,光程為1厘米,測定溶液的光密度。測定時溶液的光密度最好稀釋到0.2-1.0之間。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后,用1ml水稀釋測OD值。需要根據(jù)稀釋倍數(shù)換算出母液的OD值。
舉例:您拿到一管干粉的DNA,用1ml水溶解成母液,取該母液50μL稀釋成1ml并在1ml標(biāo)準(zhǔn)比色杯中測定的吸光度為0.25,說明該50μL中含有0.25OD的DNA,也即說明原來1ml母液中含有5OD的DNA。
OD是吸光度,核酸在260nm波長有吸收峰,可以用來測定核酸的含量。1OD引物干粉約為33微克
舉例:您拿到一管干粉的DNA,用1ml水溶解成母液,取該母液50μL稀釋成1ml并在1ml標(biāo)準(zhǔn)比色杯中測定的吸光度為0.25,說明該50μL中含有0.25OD的DNA,也即說明原來1ml母液中含有5OD的DNA。
OD是吸光度,核酸在260nm波長有吸收峰,可以用來測定核酸的含量。1OD引物干粉約為33微克
總結(jié)
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