谁了解原位PCR?
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術,就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR既能分辯鑒定帶有靶序列的細胞,又能標出靶序列在細胞內的位置,于分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉歸有重大的實用價值。原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術,使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞(爬片、甩片或涂片)或組織(石蠟、冰凍切片)上直接對靶基因片段進行擴增,通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。
原位PCR技術成功地將PCR技術和原位雜交技術結合起來,保持了兩項技術的優勢又彌補了各自的不足。根據在擴增反應中所用的三磷酸核苷原料或引物是否標記,原位PCR技術可分為直接法和間接法兩大類,此外,還有反轉錄原位PCR技術等。?原位PCR技術的基本步驟包括標本的制備。原位擴增(PCR)及原位檢測等基本環節。
原位PCR是在單細胞或組織切片上對特異的核苷酸序列進行原位PCR擴增,再進行DNA分子原位雜交以進行細胞內基因(或特定DNA片段)的定位或檢出的技術。它是原位雜交的細胞定位技術與PCR的高靈敏度相結合的一種技術,使得靶基因的檢測技術有了極大的改進。
原位PCR技術成功地將PCR技術和原位雜交技術結合起來,保持了兩項技術的優勢又彌補了各自的不足。根據在擴增反應中所用的三磷酸核苷原料或引物是否標記,原位PCR技術可分為直接法和間接法兩大類,此外,還有反轉錄原位PCR技術等。?原位PCR技術的基本步驟包括標本的制備。原位擴增(PCR)及原位檢測等基本環節。
原位PCR是在單細胞或組織切片上對特異的核苷酸序列進行原位PCR擴增,再進行DNA分子原位雜交以進行細胞內基因(或特定DNA片段)的定位或檢出的技術。它是原位雜交的細胞定位技術與PCR的高靈敏度相結合的一種技術,使得靶基因的檢測技術有了極大的改進。
總結
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