怎么检测端粒DNA长度?
生活随笔
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怎么检测端粒DNA长度?
小編覺得挺不錯(cuò)的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個(gè)參考.
現(xiàn)在有三種方法可以檢測(cè)端粒DNA的長(zhǎng)度。首先來看一下端粒DNA的構(gòu)造。細(xì)胞核中的DNA就像兩股繩一樣糾纏在一起,而端粒就是兩股繩末端加的蓋子,用來保護(hù)DNA的完整性。端粒DNA的構(gòu)造很簡(jiǎn)單,就是“TTAGGG”被反復(fù)重復(fù)成百上千遍。現(xiàn)在的三種測(cè)量端粒DNA的方法中最經(jīng)典的就是,利用限制性內(nèi)切酶將端粒DNA從染色體DNA上腦剪切下來,再通過分子生物學(xué)手段進(jìn)行測(cè)量。這種方法的發(fā)展時(shí)間長(zhǎng),而且可信度高,結(jié)果直觀。但是它也有局限性,這種方法需要抽取的血液樣本量很大,操作復(fù)雜, 并且操作水平直接影響測(cè)量的結(jié)果準(zhǔn)確性,現(xiàn)在還只限于實(shí)驗(yàn)室具有高技術(shù)水平的研究人員使用,并不適合大規(guī)模測(cè)量。還有兩種方法,共同之處都在于通過計(jì)數(shù)端粒DNA重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)來間接算出端粒DNA的長(zhǎng)度,畢竟端粒DNA是由“TTAGGG”重復(fù)組成的。這兩種方法一種是定量熒光原位雜交法,將探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,然后直接雜交到端粒DNA上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針分子特異性結(jié)合來檢測(cè)DNA序列。另一種方法是 應(yīng)用定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法測(cè)量端粒長(zhǎng)度,這也是是目前確定樣品中端粒DNA拷貝數(shù)最敏感、最準(zhǔn)確的方法,最大的優(yōu)點(diǎn)是克服了終點(diǎn)PCR法進(jìn)入平臺(tái)期后定量的較大誤差,實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA的精確定量。這兩種方法各有千秋,都對(duì)樣品的需要量很小,因此適于進(jìn)行大規(guī)模批量檢測(cè)。
你好,目前呢,所謂端粒DNA可計(jì)算人的壽命的概念,還只是停留在“假說”層面,尚缺乏充分的證據(jù)支持。端粒是染色體末端的DNA重復(fù)序列,作用是保持染色體的完整性。DNA每次復(fù)制,端粒就縮短一點(diǎn)。一旦端粒消耗殆盡,染色體則易于突變而導(dǎo)致動(dòng)脈硬化和某些癌癥。如果把染色體比作鞋帶,那么端粒就像是鞋帶兩頭的“塑料頭”,保護(hù)染色體結(jié)構(gòu)的完整性。鑒于DNA復(fù)制的特點(diǎn),新合成的DNA的末端總會(huì)比原有模板少一截,這樣DNA每復(fù)制一次,末端就會(huì)損失20-30個(gè)核苷酸。按照這個(gè)速度,細(xì)胞的DNA必將隨著分裂越來越短,以至于最后丟失殆盡,生命將無(wú)法延續(xù)。
你好,目前呢,所謂端粒DNA可計(jì)算人的壽命的概念,還只是停留在“假說”層面,尚缺乏充分的證據(jù)支持。端粒是染色體末端的DNA重復(fù)序列,作用是保持染色體的完整性。DNA每次復(fù)制,端粒就縮短一點(diǎn)。一旦端粒消耗殆盡,染色體則易于突變而導(dǎo)致動(dòng)脈硬化和某些癌癥。如果把染色體比作鞋帶,那么端粒就像是鞋帶兩頭的“塑料頭”,保護(hù)染色體結(jié)構(gòu)的完整性。鑒于DNA復(fù)制的特點(diǎn),新合成的DNA的末端總會(huì)比原有模板少一截,這樣DNA每復(fù)制一次,末端就會(huì)損失20-30個(gè)核苷酸。按照這個(gè)速度,細(xì)胞的DNA必將隨著分裂越來越短,以至于最后丟失殆盡,生命將無(wú)法延續(xù)。
總結(jié)
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