人工合成大片段基因第一步就是合成長核苷酸鏈的問題，因為核苷酸是一個個加上去的，即使每一步得率都很高，但一旦長了就沒有辦法。現在我們在invitrogen合成引物（單核苷酸鏈），單條在56個（好像？）核苷酸以下的一個價，56個以上的另一個價，最長不能超過120個，這似乎就是目前用固相亞磷酰胺三酯法合成引物的極限了。因為基因組是雙鏈的，我們可以通過合成互補的兩條單鏈退火得到需要的雙鏈，這樣得到的不過是一百來個堿基對的DNA雙鏈。而最小的有細胞結構的生物的基因組也有160kb之巨。為了得到更長的DNA雙鏈，我們可以用分子生物學的工具來做到。比如，在模板存在的情況下，我們可以通過PCR的方法，使用高保真的聚合酶，一次性擴增產生10kb以上的片段；我們還可以通過限制性內切酶和連接酶的工具，將多個DNA片段連結上；我們也能通過使用quikchange誘變的方法對DNA序列進行小范圍的修改；我們還能通過BAC、YAC等載體將得到的超長片段在細菌或酵母內保藏、擴增。如果不考慮基因組的裝配，以現在的技術，我們是能夠獲得長達一萬kb的DNA雙鏈的，請看這貨的工作：JCVI: First Self-Replicating, Synthetic Bacterial Cell Constructed by J. Craig Venter Institute Researchers。基因合成無法做到像3D打印的原因是尺度不同，3D打印是在宏觀尺度上材料的構筑，而基因合成是在分子尺度上的化學反應，它們的原材料服從的物理規律不一樣。除非咱能得心應手地操作單分子。如果我們硬要從一堆無機物，de novo做一個生命出來，俺不知道還有多遠，不過樂觀估計是以十年為單位計算的。這個問題可能是沒有意義的，因為以現有的生物資源，我們似乎只用在它們的基礎上進行修改、不斷地修改，就能夠滿足人類的需求了。而這樣的事情，不是有人在做么？此所謂：轉基因。

總結

以上是生活随笔為你收集整理的人工合成大片段基因的瓶颈是什么？的全部內容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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