怎样提取那么小的病毒?
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怎样提取那么小的病毒?
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一般情況下,我們從樣品中分離病毒,并不使用物理的“篩”或“濃縮”的辦法,請(qǐng)參考此問題實(shí)驗(yàn)室是如何分離生物病毒的?下的回答簡單的說就是先通過各種手段圈定樣品中可能含有病毒種類的范圍再用相應(yīng)的細(xì)胞去培養(yǎng)然后再收獲培養(yǎng)物里的病毒當(dāng)培養(yǎng)物里有雜質(zhì),如細(xì)胞碎片或細(xì)菌等,可利用病毒極小的特性,將培養(yǎng)物中的大體積物質(zhì)篩掉,實(shí)驗(yàn)室操作中我們一般采用0.22μm的濾器。但有的時(shí)候,通過在細(xì)胞上繁殖病毒,也獲取不了我們需要的濃度的病毒,那么就可以采用物理的方法來進(jìn)一步濃縮病毒比如超濾法超濾_百度百科(這也是最接近題主問題中“篩”這一概念的方法)超濾法的關(guān)鍵是超濾膜,可以簡單理解為孔徑極小的篩子當(dāng)含有病毒的溶液通過超濾膜時(shí),病毒就被留在了篩子上,而溶質(zhì)和小分子物質(zhì)如各種無機(jī)鹽等就被濾過了,之后再拿一定體積的液體把病毒從篩子上溶解下來,就實(shí)現(xiàn)了濃縮。超濾法的局限在于1.濃縮倍數(shù)有限,一般能濃縮20倍到50倍2.當(dāng)濾液中還含有其它尺寸大于濾膜孔徑的雜質(zhì)時(shí),會(huì)和病毒一起留在濾膜上。所以當(dāng)對(duì)濃縮倍數(shù)要求更高,或者要求獲取的濃縮病毒大分子雜質(zhì)含量很低時(shí),就可以選擇超離法 超速離心_百度百科了。超速離心簡單說,就是利用BT的重力把含病毒溶液里的病毒甩下來。在病毒純化時(shí),我們常用的方法是密度梯度離心法首先,在離心管中按濃度低至高配置離心介質(zhì),如圖左所示的蔗糖然后放到BT離心機(jī)里高速甩倆小時(shí)候要分離的樣品里的物質(zhì)就按密度排列在離心管里了這時(shí)再按密度取出需要的條帶并重新溶解就好了。
總結(jié)
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