请问碧云天细胞衰老试剂盒可以做石蜡切片吗?步骤如何?还有做细胞染色时需要提前调整PBS的酸碱度吗?
生活随笔
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请问碧云天细胞衰老试剂盒可以做石蜡切片吗?步骤如何?还有做细胞染色时需要提前调整PBS的酸碱度吗?
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碧云天細(xì)胞衰老試劑盒可以用于石蠟切片。步驟大致如下:
1. 固定細(xì)胞。將需要切片的細(xì)胞進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓潭ㄌ幚恚梢赃x擇用含有4%多聚甲醛(PFA)的PBS進(jìn)行固定,或者用其他適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ哼M(jìn)行固定處理。
2. 去水脫脂。將固定后的細(xì)胞進(jìn)行去水脫脂,可以分別使用75%、85%、95%和100%的乙醇,并在每個(gè)濃度的乙醇中浸泡2-5分鐘。
3. 滲透。用xylene將細(xì)胞滲透,浸泡幾分鐘,直到細(xì)胞透明,使其可以在石蠟中被浸潤。
4. 浸蠟。用石蠟進(jìn)行浸潤,浸泡時(shí)間應(yīng)該較長,一般為幾小時(shí),或者一整夜。
5. 制片。用石蠟切片機(jī)將包含細(xì)胞的石蠟塊切成薄片,通常為5-10μm。
6. 然后進(jìn)行染色、顯微鏡檢測等后續(xù)步驟。
關(guān)于調(diào)整PBS的酸堿度,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求進(jìn)行調(diào)整。如果需要在染色前做酸堿度調(diào)整,則可以將PBS調(diào)整到理想的PH值,比如7.4。如果染色后需要酸堿度調(diào)整,則可以用緩沖液進(jìn)行調(diào)整。如果實(shí)驗(yàn)方案沒有特別要求,則可以使用一般PH值的PBS,不需要進(jìn)行額外調(diào)整。
總結(jié)
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