爆款入门 | 第 14 期微生物组-扩增子16S分析和可视化(线上/线下同时开课,2022.4)...
福利公告:為了響應(yīng)學(xué)員的學(xué)習(xí)需求,經(jīng)過易生信培訓(xùn)團(tuán)隊(duì)的討論籌備,現(xiàn)決定安排擴(kuò)增子16S分析、宏基因組、轉(zhuǎn)錄組的線上/線下同時(shí)開課。報(bào)名參加線上直播課的老師可在1年內(nèi)選擇參加同課程的一次線下課?。期待和大家的線上線下會晤。
目前課程安排:
臨床基因組學(xué)線上/線下開課時(shí)間:2022/02/25-2022/02/27
宏基因組線上/線下開課時(shí)間:2022/3/25-2022/3/27
轉(zhuǎn)錄組線上/線下開課時(shí)間:2022/4/15-2022/4/17
擴(kuò)增子線上/線下開課時(shí)間:2022/4/8-2022/4/170
臨床基因組學(xué)線上/線下開課時(shí)間:2022/4/22-2022/4/24
報(bào)名鏈接:http://www.ehbio.com/Training/
在廣大粉絲的期待下,《生信寶典》聯(lián)合《宏基因組》在北京于2022-4-8到 2022-4-10推出《擴(kuò)增子16S分析》專題培訓(xùn)第14期(線上課和線下課程同步開通),為大家提供一條走進(jìn)生信大門的捷徑、為同行提供一個(gè)擴(kuò)增子分析實(shí)戰(zhàn)學(xué)習(xí)和交流的機(jī)會、助力學(xué)員真正理解分析原理和完成實(shí)戰(zhàn)分析,獨(dú)創(chuàng)四段式教學(xué)(3天集中授課+自行練習(xí)2周+集中講解答疑+上課視頻回看反復(fù)練習(xí)),“教—練—答—用”四個(gè)環(huán)節(jié)統(tǒng)一協(xié)調(diào),真正實(shí)現(xiàn)獨(dú)立分析大數(shù)據(jù)。
關(guān)于學(xué)習(xí)生物信息學(xué)分析的重要性,請閱讀《生物信息9天速成班—成為團(tuán)隊(duì)中不可或缺的人》。
課程簡介
宏基因組/微生物組是當(dāng)今世界科研最熱門的研究領(lǐng)域之一,為加強(qiáng)本領(lǐng)域的技術(shù)交流與傳播,推動(dòng)中國微生物組計(jì)劃發(fā)展,中科院青年科研人員創(chuàng)立“宏基因組”公眾號,目標(biāo)為打造本領(lǐng)域純干貨技術(shù)及思想交流平臺。成立兩年,分享專業(yè)技術(shù)原創(chuàng)文章2900+篇,關(guān)注人數(shù)12萬+,累計(jì)閱讀量29,000,000+。
請?jiān)敿?xì)閱讀課程簡介,如果以下內(nèi)容您全精通,不必參加此培訓(xùn)。
本課程一共3天,每天6節(jié)課,共18節(jié)課,全部課程均理論與實(shí)戰(zhàn)結(jié)合(只要課上講的內(nèi)容,都是要帶你親自實(shí)現(xiàn)的分析)。從分析平臺搭建、Linux和R基礎(chǔ)、圖表解讀和繪圖實(shí)戰(zhàn)、擴(kuò)增子分析標(biāo)準(zhǔn)流程、功能預(yù)測、差異統(tǒng)計(jì)分析以及各類高級分析(進(jìn)化樹、網(wǎng)絡(luò)、環(huán)境因子、隨機(jī)森林、Adaboost和來源追溯等),和CNS級圖片編輯和排版。3天時(shí)間,老司機(jī)帶您完成自學(xué)需要3個(gè)月甚至是3年的崎嶇之路,助力您真正玩轉(zhuǎn)擴(kuò)增子分析。
課程大綱
每節(jié)課1小時(shí)一個(gè)主題,理論結(jié)合實(shí)戰(zhàn),學(xué)懂原理,實(shí)戰(zhàn)操作,全是老司機(jī)多年經(jīng)驗(yàn)和代碼的無私分享。下面是課程安排,如11代表第一天第一節(jié)課,26代表第二天第六節(jié)課,41為兩周后的線上集中視頻答疑。
| 11 | 分析平臺搭建 | Win10:git、R、Rstudio、R包、STAMP、AI等 |
| 12 | Linux基礎(chǔ) | 簡介、優(yōu)勢、常用操作、序列處理、軟件安裝等 |
| 13 | R基礎(chǔ) | 發(fā)展史、生物學(xué)中應(yīng)用、ggplot2繪圖、模板 |
| 14 | 圖表解讀 | 常用16種圖表意義、使用場景 |
| 15 | 結(jié)果可視化 | 16種圖表的數(shù)據(jù)整理和在線繪制 |
| 16 | 發(fā)表級圖版制作 | Adobe Illustrator制作CNS標(biāo)準(zhǔn)圖版 |
| 21 | 擴(kuò)增子介紹 | 背景知識、分析原理、科學(xué)問題 |
| 22 | 擴(kuò)增子分析流程 | vsearch+usearch跨平臺分析流程 |
| 23 | STAMP統(tǒng)計(jì)分析 | 玩轉(zhuǎn)樣本篩選、差異比較和統(tǒng)計(jì)圖表保存 |
| 24 | 多樣性分析 | R語言實(shí)現(xiàn)多樣性、物種組成和差異比較圖表 |
| 25 | QIIME2 | Linux平臺QIIME2私人定制流程 |
| 26 | 網(wǎng)絡(luò)分析 | 文章解讀,實(shí)戰(zhàn)網(wǎng)絡(luò)繪制和屬性比較 |
| 31 | PICRUSt功能預(yù)測 | KEEG功能組成預(yù)測和統(tǒng)計(jì)繪圖 |
| 32 | Faprotax,Bugbase | 細(xì)菌元素循環(huán)和表型層面功能挖掘 |
| 33 | 機(jī)器學(xué)習(xí) | 隨機(jī)森林分類回歸,重現(xiàn)兩篇Nature分析、來源追溯 |
| 34 | 進(jìn)化分析 | 序列篩選、比對、進(jìn)化樹構(gòu)建和美化 |
| 35 | 環(huán)境因子 | 文章解讀,高分文章重現(xiàn) |
| 36 | 研究熱點(diǎn)展望 | 總結(jié)、把握研究熱點(diǎn)、展望技術(shù)發(fā)展趨勢 |
| 37 | 考試50題 | 自評學(xué)習(xí)效果、知識點(diǎn)回顧 |
| 41 | 答疑-線上 | 答疑、考試內(nèi)容串講 |
教程內(nèi)容簡介如下:
一、生信基礎(chǔ)知識和技巧
還在為沒有Linux服務(wù)器而無法分析擴(kuò)增子數(shù)據(jù)而苦惱嗎?其實(shí)你的個(gè)人電腦就是擴(kuò)增子分析的利器。易生信團(tuán)隊(duì)獨(dú)創(chuàng)實(shí)現(xiàn)了跨平臺的分析流程,在大家的Windows筆記本上可以輕松實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增子領(lǐng)域的絕大多數(shù)分析,第一節(jié)課帶你輕松在自己的本本上搭建數(shù)據(jù)分析平臺。
圖1. 易生信首創(chuàng)基于Win10優(yōu)化的擴(kuò)增子分析流程,筆記本秒變大數(shù)據(jù)分析平臺
推薦使用Windows10系統(tǒng),8G及以上內(nèi)存分析更流暢。 我們也會分享給大家在Linux上配置整個(gè)分析流程的代碼 (Mac跟Linux類似,無須區(qū)別對待,但部分軟件可能安裝方式不同,未做深入測試,不建議參加培訓(xùn)時(shí)使用)。
同時(shí)講解生物學(xué)家必要掌握的Shell和R語言基礎(chǔ)知識,保證你高效、穩(wěn)定的使用擴(kuò)增子分析平臺。
圖2. Shell和R學(xué)習(xí)大綱,首創(chuàng)Rstuio中鼠標(biāo)點(diǎn)擊可完成Shell腳本和R語言分析,既打開生信的大門,又不會增加生物學(xué)家時(shí)間成本
二、圖表解讀和繪制
針對很多老師缺少系統(tǒng)的生信背景,看不懂分析文章圖表,更對繪制各式圖表手足無措。
我們推出過如下兩個(gè)系列,共16篇原創(chuàng)文章,對8種圖形進(jìn)行講解和R語言繪圖。
擴(kuò)增子圖表解讀-理解文章思路
擴(kuò)增子統(tǒng)計(jì)繪圖-沖擊高分文章
但這些只是入門,在培訓(xùn)上,我們將結(jié)合發(fā)表高水平文章,進(jìn)一步講解16種常用分析圖型結(jié)果的原理和使用范圍,讓您不僅讀懂圖,更知道如何應(yīng)用于自己的研究,并親自輕松完成繪圖。
針對大家使用R語言繪圖學(xué)習(xí)時(shí)間成本較高的問題,易生團(tuán)隊(duì)針對常用16種圖開發(fā)了免費(fèi)繪圖網(wǎng)站,一鍵出圖,更可鼠標(biāo)點(diǎn)選參數(shù)修改圖形的個(gè)性樣式。
圖3. 16種常用圖形的繪制。可使用我們的在線繪圖工具實(shí)現(xiàn)。
為了讓各種統(tǒng)計(jì)圖片實(shí)現(xiàn)出版級的組圖,特開設(shè)了一節(jié)Adobe Illustrator修圖排版課,講述基本使用技巧,輕松掌握精髓,讓你文章圖版檔次向CNS看齊,輕松成為實(shí)驗(yàn)室的修圖和拼圖達(dá)人。
圖4. AI排版本子圖為CNS出版級組圖示例(Science, 2016封面文章)
三、擴(kuò)增子基礎(chǔ)和分析流程
圖5. 典型的擴(kuò)增子結(jié)構(gòu)模型圖
擴(kuò)增子背景知識
背景:國際微生物組(人類HMP、環(huán)境EMP)計(jì)劃、中國微生物組計(jì)劃
研究對象:人、動(dòng)物、植物、環(huán)境
研究方法:培養(yǎng)組學(xué)、擴(kuò)增子測序 (最常用)、宏基因組、宏轉(zhuǎn)錄組、宏蛋白組、宏代謝組、宏表觀組等
宏基因組學(xué)的研究熱點(diǎn):微生物多樣性、宏基因組、培養(yǎng)組、腸菌與疾病、MWAS
擴(kuò)增子基本原理:細(xì)菌/古菌 16S、真菌18S/ITS結(jié)構(gòu)、引物選擇等
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):樣品制備和建庫中的誤區(qū)
文章套路:擴(kuò)增子分析SCI文章的物種組成、功能預(yù)測常用套路
主流方法優(yōu)缺點(diǎn)比較:QIIME、QIIME2、mothur、Usearch-unois3、dada2等方法
擴(kuò)增子分析流程
之前我們發(fā)布了基于QIIME(引用24000+)+USEARCH(引用14000+)組合的史上最詳細(xì)中文擴(kuò)增子分析流程,累計(jì)閱讀10000+。
擴(kuò)增子分析流程-把握分析細(xì)節(jié)
同時(shí)在2017年推出了2018年正式接檔QIIME的最新流程QIIME2的官方中文幫助文檔,累計(jì)閱讀10萬+。
QIIME2中文教程-把握分析趨勢
想使用QIIME和QIIME2的小伙伴可直接點(diǎn)擊上方鏈接學(xué)習(xí)。課上也會帶大家用服務(wù)器操作,分享最新私人定制流程。
但上面兩種分析流程仍有很多缺點(diǎn),如需要Linux服務(wù)器,安裝和操作復(fù)雜,學(xué)習(xí)時(shí)間成本過高等不足。
易生信團(tuán)隊(duì)組織宏基因組、生信寶典的一線生信專家,為廣大生物學(xué)家,定制了一套安裝部署簡單、鼠標(biāo)點(diǎn)擊編程、支持主流操作系統(tǒng)、學(xué)習(xí)成本低、又靈活的擴(kuò)增子分析流程,助力生物學(xué)家輕松分析數(shù)據(jù),更專注生物學(xué)現(xiàn)象的挖掘。
圖6. 擴(kuò)增子分析流程金字塔,數(shù)據(jù)量從下向上逐漸減少
擴(kuò)增子流程如下:
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的編寫
Illumina測序數(shù)據(jù)的質(zhì)控:fastqc, mulitqc
質(zhì)控流程:雙端序列合并、切除barcode和引物、質(zhì)控
生成OTU/ASV:序列去冗余、聚類clust_otu生成OTU或unoise3去噪生成ASV(Amplicon Sequence Variants)
OTU篩選:嵌合體生成原理及去除方法、去除線粒體、葉綠體和宿主非特異擴(kuò)增污染、生成代表性序列和OTU表
物種注釋及進(jìn)化樹構(gòu)建
常用Alpha多樣性指數(shù)計(jì)算
常用Beta多樣性距離矩陣計(jì)算
現(xiàn)在你可以在自己筆記本或臺式機(jī)上輕松分析擴(kuò)增子啦!并且支持最新的去噪生成ASV方法,想自己親自分析的朋友,快來北京參加擴(kuò)增子專題培訓(xùn)班吧!
圖7. 常用宏基因組統(tǒng)計(jì)作圖軟件STAMP & LEfSe
引用過千次的STAMP繪制Extended barplot大家應(yīng)該很常見,帶你半小時(shí)速成。LEfSe引用超4000+次,它的柱狀圖和圈圖隨處可見,但服務(wù)器超級難用,即上傳痛苦,又要久等。我們?yōu)閷W(xué)員定制了國內(nèi)專享服務(wù)器,隨時(shí)為你服務(wù)。有服務(wù)器的伙伴還可以獲得安裝和使用的教程,在自己的服務(wù)器上可重復(fù)計(jì)算,不受網(wǎng)絡(luò)和地域限制自己隨時(shí)隨地使用。
四、可重復(fù)計(jì)算和統(tǒng)計(jì)繪圖
對于可重復(fù)計(jì)算要求比較高、對細(xì)節(jié)有進(jìn)一步分析要求的學(xué)員,我們還會教大家當(dāng)前最頂級的R語言統(tǒng)計(jì)分析框架,讓你零基礎(chǔ)輕松實(shí)現(xiàn)可重復(fù)計(jì)算,滿足頂級文章的代碼公開和網(wǎng)頁可重復(fù)要求(這些資源在生信公司是價(jià)格幾十萬的絕密流程代碼,一般人是沒有機(jī)會見到的)。
圖8. 數(shù)10種高質(zhì)量圖的R源代碼實(shí)現(xiàn)可重復(fù)計(jì)算
在自己電腦上輕松修改輸入文件、參數(shù)。可全程記錄分析過程,保證從數(shù)據(jù)到發(fā)表級圖形的可重復(fù)計(jì)算,讓團(tuán)隊(duì)分析水平上升到大牛級別。
Alpha多樣性各種指數(shù):Shannon、Chao1、Observed OTU、PD whole tree等,并配合Anova,LSD統(tǒng)計(jì);
Beta多樣性各種距離矩陣:Bray Curtis、Jaccard、Weighted Unifrac、Unweighted Unifrac等結(jié)果的樹狀圖、箱線圖、散點(diǎn)圖展示樣品間差異;并配合Adonis, Anosim, MRPP統(tǒng)計(jì)
有監(jiān)督的主坐標(biāo)軸分析 (CCA/RDA),展示組間差異,anova.cca統(tǒng)計(jì)
DESeq/edgeR/t.test/wilcoxon統(tǒng)計(jì)組間差異,計(jì)算Pvalue和FDR
熱圖、曼哈頓圖、火山圖展示兩組間比較差異分類單元、OTU/ASV
韋恩圖、三元圖、網(wǎng)絡(luò)圖展示兩組及多組間相同與不同
五、功能預(yù)測和機(jī)器學(xué)習(xí)
學(xué)習(xí)PICRUSt分析原理、常用結(jié)果展示樣式及文章解讀。實(shí)戰(zhàn)進(jìn)行官網(wǎng)、本地、在線分析,并對結(jié)果進(jìn)行整理,方便STAMP、LEfSe以及R分析。下圖為預(yù)測結(jié)果經(jīng)STAMP快速分析的結(jié)果展示,學(xué)員可以在老師帶領(lǐng)下35分鐘內(nèi)完成以上分析。
圖9. 功能預(yù)測結(jié)果使用STAMP統(tǒng)計(jì)和可視化
對于不滿足用KEGG功能預(yù)測和統(tǒng)計(jì)結(jié)果的小伙伴,我們還進(jìn)一步講解FAPROTAX (2016, Science)的分析,適合研究環(huán)境、元素循環(huán)的同行;此外還有BUGBASE分析,實(shí)現(xiàn)細(xì)菌代謝、厭氧性、革蘭氏分類等表型預(yù)測,適合醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的同行使用。
圖10. 重現(xiàn)兩篇Nature文章機(jī)器學(xué)習(xí)分類和回歸分析
上圖:Wilck-2017-Nature,采用Adaboost進(jìn)行分類和測試集驗(yàn)證準(zhǔn)確率。
下圖:Subramanian-2014-Nature,采用隨機(jī)森進(jìn)行回歸、交叉驗(yàn)證、測試集檢驗(yàn)?zāi)P蜏?zhǔn)確率和熱圖展示特征OTUs時(shí)間序列變化。
高分文章離我們并不是遙不可及,在你的本本上,1個(gè)小時(shí)輕松重現(xiàn)每一個(gè)子圖的分析和繪制。讀懂這兩類分析的結(jié)果。
六、網(wǎng)絡(luò)和環(huán)境因子分析
圖11. 兩組網(wǎng)絡(luò)比較、以及網(wǎng)絡(luò)屬性比較(Wang-2018-Gut)
還以為隨便畫個(gè)網(wǎng)絡(luò)就能當(dāng)文章的主圖嗎?這個(gè)時(shí)代早已成為歷史。現(xiàn)在的高分文章,至少要求多網(wǎng)絡(luò)比較,標(biāo)配網(wǎng)絡(luò)屬性比較。在這里有微生物所微生物網(wǎng)絡(luò)研究方向的博士,帶你進(jìn)入網(wǎng)絡(luò)的世界,四步走實(shí)現(xiàn)即美觀又有意義的網(wǎng)絡(luò)分析:讀懂網(wǎng)絡(luò)——繪制單個(gè)網(wǎng)絡(luò)——繪制多個(gè)網(wǎng)絡(luò)——網(wǎng)絡(luò)屬性比較及可視化。這么前沿的技術(shù),估計(jì)世界范圍內(nèi)只有這里會教你。
圖12. 環(huán)境因子分析(Metcalf-2016-Science)
環(huán)境因子分析是很多研究的標(biāo)配,常用的Vegan包引用過萬次就知道它的重要性。但平時(shí)看到的圖不是低分文章,就是不夠美觀。易生信團(tuán)隊(duì)精選Rob Knight團(tuán)隊(duì)2016年Science雜志中經(jīng)典環(huán)境因子分析為例,讓你的分析和可視化一步到位,向CNS看齊。
往期精彩回顧
主講教師
主講老師包括中科院微生物所、遺傳發(fā)育所、基因組所、生物物理所等多名本領(lǐng)域一線技術(shù)專家。
劉永鑫,博士,中科院高級工程師,青促會會員。2008年畢業(yè)于東北農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物學(xué),2014年于中國科學(xué)院大學(xué)獲生物信息學(xué)博士,2016年博士后出站。宏基因組公眾號創(chuàng)始人。目前主要研究方向有微生物組數(shù)據(jù)分析與解讀、分析方法開發(fā)與優(yōu)化和科學(xué)傳播。目前以第一作者(含共同)或微生物組數(shù)據(jù)分析負(fù)責(zé)人在Science、Nature Biotechnology、Cell Host & Microbe?等雜志發(fā)表論文30余篇,引用五千余次。微生物組分析平臺QIIME 2項(xiàng)目參與人。受邀以第一作者和/或通訊作者(含共同)在Protein & Cell、Current Opinion in Microbiology、遺傳?等雜志發(fā)表微生物組研究方法綜述。2017年7月創(chuàng)辦“宏基因組”公眾號,目前分享本領(lǐng)域相關(guān)原創(chuàng)文章2900余篇,代表作品有《微生物組圖表解讀、分析流程和統(tǒng)計(jì)繪圖》、《QIIME2中文教程》等,關(guān)注人數(shù)12萬+,累計(jì)閱讀2900萬+。
陳同,博士,副研究員,2015畢業(yè)于中科院遺傳發(fā)育所,生物信息博士,在Cell Stem Cell(IF=23.2,第一作者兼封面文章)、Nature Communications、Nucleic Acids Research X 3、Protein & Cell?等高水平雜志以第一作者或主要作者發(fā)表文章,運(yùn)營有數(shù)十萬人關(guān)注的《生信寶典》微信公眾號,給你不一樣的學(xué)習(xí)生信體驗(yàn)。
授課模式
本課程以講解流程和實(shí)際操作為主,采用獨(dú)創(chuàng)四段式教學(xué):
第一階段 3天集中授課;
第二階段 自行練習(xí)2周;
第三階段 在線直播答疑;
第四階段 培訓(xùn)視頻繼續(xù)學(xué)習(xí);
實(shí)現(xiàn)教-練-答-用四個(gè)環(huán)節(jié)的統(tǒng)一協(xié)調(diào)。
培訓(xùn)時(shí)間
2022-4-15到 2022-4-17(線上/線下同步開放)
每天早9點(diǎn)到晚6點(diǎn),半封閉式教學(xué) (最后1小時(shí)為集中討論時(shí)間,最后一天會稍微提前一些,多留出時(shí)間討論,也方便老師乘車返回)
報(bào)到時(shí)間:上課當(dāng)天
授課地點(diǎn)
線上線下同步開課:在線會議平臺,如騰訊會議。
北京市海淀區(qū)中關(guān)村東路18號 財(cái)智國際大廈C座 C1105
課程價(jià)格
1. 開課兩周前報(bào)名 4500 元/人 (住宿自行解決,提供培訓(xùn)期間午餐)
2. 名額有限,每次課程報(bào)名滿40人后自動(dòng)關(guān)閉報(bào)名通道
3. 提供易漢博基因科技實(shí)習(xí)機(jī)會或工作機(jī)會
注意事項(xiàng) *
1. 需自備筆記本電腦。推薦使用Win10系統(tǒng),4G以上內(nèi)存。如果使用其它操作系統(tǒng),以培訓(xùn)軟件能安裝運(yùn)行為主。
2. 課程實(shí)踐根據(jù)需要會提供云計(jì)算平臺。
3. 培訓(xùn)班所有數(shù)據(jù),文檔為內(nèi)部資料,僅供參閱,未經(jīng)允許不得翻印外傳登刊。
4. 上課期間禁止錄音,錄像。
5. 成功付款的學(xué)員,若臨時(shí)有緊急事情不能到來的,可申請延期,更換后續(xù)培訓(xùn)班;也可申請退款。
6. 若臨時(shí)有事不能參加,請?zhí)崆奥?lián)系。開課前兩周退報(bào),預(yù)付款全退。開課前兩周內(nèi),預(yù)付款退800元,開課前一周內(nèi),預(yù)付款退500,開課前兩天,預(yù)付款不退。
7. 不可先延期再退款。
更多課程的詳細(xì)介紹,請掃描下方二維碼。
易生信同時(shí)推出多門相關(guān)課程,連報(bào)、團(tuán)購有優(yōu)惠!
連報(bào)優(yōu)惠——連報(bào)n門課,每個(gè)課程便宜n-1百元;
連報(bào)課程的優(yōu)惠不出現(xiàn)在第一門,而是已累計(jì)的形式出現(xiàn)在后面幾門中,也就是第一門完成了第二門才有優(yōu)惠。
老學(xué)員優(yōu)惠:
第二門課程減100,第三門課程減200,后面類比,最多不超過500元。
多人組團(tuán)優(yōu)惠,優(yōu)惠幅度為參團(tuán)人數(shù)-1百元 (報(bào)名時(shí)付款時(shí)有團(tuán)員退出的,優(yōu)惠按實(shí)際參團(tuán)人數(shù)計(jì)算)。
4. 優(yōu)惠后最終價(jià)格最低不低于4000元。優(yōu)惠信息處于動(dòng)態(tài)變化中,價(jià)格以系統(tǒng)最終計(jì)算出的正確價(jià)格為準(zhǔn)。
訪問 http://www.ehbio.com/Training/ 或點(diǎn)擊閱讀原文跳轉(zhuǎn)報(bào)名頁
總結(jié)
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