佐劑（adjuvant）是指預先或與抗原同時注入體內，能夠增強機體對該抗原免疫應答的非特異性免疫增強性物質。目前最常用于動物實驗的佐劑是弗氏完全佐劑（complete Freund's adjuvant, CFA）和弗氏不完全佐劑（incomplete Freund's adjuvant, IFA）。在進行人工免疫誘導實驗中，常將佐劑與抗原溶液按比例混合進行乳化，以增強抗原誘導機體發生的免疫反應，獲得高效價抗體。

佐劑的作用機制主要為：

（1）改變抗原物理性狀，延緩抗原降解，延長抗原在體內潴留時間。

（2）刺激抗原提呈細胞，增強其對抗原的加工和提呈。

（3）刺激淋巴細胞的增殖分化，增強和擴大免疫應答效應。

作為疫苗制備的關鍵環節，抗原乳化是將佐劑與抗原溶液按比例混合，制備成 “油包水”乳劑的過程， 其作用機制是在有油和水的混合物中加入乳化劑（本實驗為羊毛脂）后，進行機械混合，

一方面，乳化劑的親水基結合水，親油基結合油，使油-水兩相之間形成一層致密的介面膜，降低了油與水之間的接口張力形成小液滴，同時對液滴起保護作用；

另一方面，由于乳化過程中吸附和摩擦等作用使得液滴表面帶電，帶電液滴在接口的兩側會形成雙電層結構，其排斥作用使得小液滴難以聚集，從而提高了乳化液的穩定性。理想的乳化能增強機體的免疫應答，提高免疫抗原的保護效果。

因此，乳化過程十分重要，而佐劑、抗原溶劑、時間、溫度、乳化器及操作技巧等每個環節的變化，都會影響乳化效果。

目前已有報道，去離子水和 PBS 緩沖液都可以作為抗原乳化的溶劑，且在乳化過程中不改變抗原的結構和免疫原性。 本實驗結果顯示，以去離子水為溶劑進行 GPI 多肽抗原和 CFA 乳化，是一個緩慢而溫和的過程，乳化時間相對較長，便于人工控制，但冰浴乳化操作較繁瑣。以 PBS 緩沖液為溶劑進行乳化，則是一個快速的過程，乳化完成時間較短（2～5 min），容易乳化過度，難以人工控制。這可能是由于 PBS 緩沖液中的磷酸根基團之間的靜電斥力作用，增強了乳化液的穩定性 , 從而加速了完全乳化的過程。如果繼續乳化（時間較短），PBS 緩沖液中 Na+ 、K+ 離子與磷酸根基團充分接觸，壓縮雙電層，使其厚度變薄，乳狀液的穩定遭到破壞，小液滴聚集，乳劑粘度增加，導致乳化過度 。 實驗結果提示，若在可控制乳化程度的前提下加快乳化速度，可以嘗試用無菌水為主要溶劑，添加少量或低濃度的 PBS 緩沖液作為輔助溶劑。至于無菌水與添加 PBS 緩沖液的比例和條件，還需要進一步試驗進行摸索。

此外，乳化器的材質和乳化過程的溫度也很重要。如果選用一次性塑料注射器，因其封閉良好、不易漏液更適用于少量的或昂貴的抗原乳化，但其摩擦阻力較大，乳化時間越長越難推動；有時還可能因為樣品量大，乳化時間長出現掉色現象，使溶液變黑，影響實驗效果。玻璃注射器克服了塑料的材質問題，且磨砂針芯有利于抗原乳化，但不足是玻璃注射器易漏，容易造成抗原的浪費。此外，低溫條件雖然使乳化速度變慢，卻能防止抗原變性，所以用注射器推拉乳化抗原的操作要在冰浴條件下進行。

綜上所述，抗原乳化過程中，需要綜合考慮抗原溶劑、乳化程度的可控性、乳化器材質、環境溫度等綜合因素，方能得到最佳的乳化效果：既保持抗原的穩定性，又延長抗原在動物體內的時間，提高免疫原性，成功造模。

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儀器檔案：

名稱：全自動多通道抗原乳化儀

產地：中國

應用領域及作用：應用于抗體制備的抗原乳化過程，可自動將抗原與福氏佐劑制成乳劑...

適用：

適用于生物科研機構、生物公司制備抗體需要免疫動物 時，自動將抗原與弗氏佐劑制成乳劑 ，然后給動物注射。此款多通道全自動乳化儀可以根據客戶需求同時進行最多5/20組的相同或者不同抗原的乳化，解放雙手，高效省時。

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總結

以上是生活随笔為你收集整理的【测评】抗原乳化方法学评测：去离子水乳化、机械乳化法、PBS 缓冲液乳化..的全部內容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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